呕吐毒素检测试剂盒(定量) DONSensor kit (QUANTI)
试剂盒型号:KIT065 温育温度:40℃
简介:
注意事项:
——使用研磨机磨碎样品,使样品颗粒小于20目;
——在提取过程中需使用能够直立放置的50mL离心管。
—— 提取过程中所用水为超纯水或者去离子水;
—— 震荡提取时,使用涡旋震荡器的最大速度;
—— 样品震荡提取后,静置2分钟,使其能够取出10μL上清液,避免吸入颗粒或沉淀物;
—— 将提取液和缓冲液混合均匀待测;
—— 必须使用新鲜的提取液进行检测;
操作要点:
l 吸取200μl稀释后的提取液样品加到装有冻干试剂的微孔中,10次抽吸混合均匀;
l 将测试条插入到试剂微孔中;
l 40℃下温育5分钟;
l 从微孔中取出测试条,去掉下端的吸水海绵,直接目测测试条颜色强度或使用Readsensor进行结果判读。
反应机理:
Donsensor是一种竞争性检测,含有与呕吐毒素(DON)分子高度亲和力的特定抗体。检测是由两部分组成,一部分是包含有一定数量的金标抗体的试剂微孔,另一部分是测试条。对于一个有效的检测,位于试纸条最上方的红色控制线(CTRL),在温育反应以后显色可见。当微孔中的试剂和谷物或饲料提取液反应时,特定的抗体会结合相应的分析物。当插入测试条后,样品液体会沿着测试条垂直向上渗透并通过测试条上的捕获区域。当样品中没有呕吐毒素时,测试条上检测线(Test)位置处会出现有颜色的条带,指示样品中不存在呕吐毒素;相反,如果样品中有呕吐毒素存在时,测试条上的检测线位置处颜色将减弱或不会出现有颜色的条带。
试剂盒组分:
每个试剂盒所含试剂可供24次检测。
l 每盒3筒,每筒含8个装有冻干试剂的微孔和8个测试条;
l 1瓶装量为30mL的缓冲液;
l 1份说明书
配套仪器及试剂:
l 1台温育器(Heatsensor,温育温度为40℃)
l 1台判读仪(Readsensor)
l 1台涡旋震荡器
l 能够直立放置的50mL离心管
l 超纯水或去离子水
l 能够调节量程的移液器
注意事项:
1. Readsensor读数仪需要提前被打开并作好准备(详见Readsensor使用说明书)。
2. 试剂盒应保存在2℃-8℃的阴凉干燥处。使用前恢复到室温,避免暴露在潮湿和光照的条件下。
3. 检测的最佳温度为40℃±1℃,可使用“Heatsensor”温育器,不建议使用其他类型温育器(请按照温育器操作说明书正确设定温育时间和温度)。
4. 反应结束后,应立刻读取结果。如超过2分钟读取结果,视为无效。
5. 测试条干燥后颜色强度会增加。
6. 如发现阳性结果,检测结果需要进行确证。
7. 使用试剂时,用完一筒试剂再打开另外一筒,以免受潮失效。
操作步骤:
可用于批量检测,也可用于单一测试。在操作过程中,混合试剂和待测样品、插入或取出测试条等步骤要尽量避免时间延误。请保证检测样品温育时间和温度的一致性。如果每次检测样品超过3个,请使用多通道移液器加样。如果一次检测样品数量超过8个,请按照8个一组,分批检测。
1. 彻底洗干净手,从冰箱中取出试剂盒,在干燥洁净的实验条件下进行操作;
2. 调节温育器温度至40℃,并稳定在40℃;
3. 准备开始实验前,请先将试剂盒恢复至室温,同时认真阅读操作说明;
l 试剂筒包含两部分:测试条和装有冻干试剂的微孔。
4. 确定待测样品数量,并在每管样品上做好标记。
l 样品进行提取步骤前必须研磨成粉状(颗粒大小<20目)。样品提取完成后,直接取上清提取液经缓冲液稀释100倍后,混合均匀待测。
5. 打开装有微孔的试剂筒,取出所需要数量的微孔;
l 打开试剂筒时,先去除筒盖上的安全环,再用拇指将筒塞推开;
l 检测试剂从试剂筒取出后,请立即盖好试剂筒盖;
l 用完一筒试剂再打开另外一筒;
l 如果一次用不完8个微孔,可用微孔盖盖住剩余微孔,并立即放回到装有干燥剂的试剂筒中密封保存。
l 取出相应数量的试剂条,并编号。
6. 将微孔放置于温度设定为40℃的温育器上;
7. 将微量移液器装上新吸头,吸取200μl的样品于微孔中反复抽吸混合均匀;
8. 提示:当试剂与样品混合,反应已经开始。迅速混合并同时开始5分钟的计时;
9. 当5分钟温育结束,停止计时,取出测试条去掉下端的海绵垫,进行结果判读;
10. 检验完毕,余下的测试条放回试剂筒并盖紧筒盖,放回试剂盒,2℃-8℃保存。