牛奶三聚氰胺检测试剂盒Milk MelamineSensor kit
试剂盒型号:KIT029 温育温度:40℃
简介:
Melaminesensor试剂盒利用免疫学原理,通过三聚氰胺抗体和三聚氰胺的特异性结合,快速测定牛奶样品中三聚氰胺的含量。
方法一操作要点(250 ppb):
l 吸取200μl牛奶样品加入装有冻干试剂的微孔中5-10次抽吸,混合均匀
l 将加入牛奶样品的冻干试剂微孔放置在温度设定为40℃的温育器上
l 40℃下温育1分钟(温育时间不要超过1分钟)
l 将测试条插入到试剂微孔中
l 40℃下继续温育4分钟
l 从微孔中取出测试条
l 去掉测试条下端的吸水海绵,直接目测测试条颜色强度或使用Readsensor仪器进行结果判读
方法二操作要点(125-250 ppb):
l 吸取200μl牛奶样品加入装有冻干试剂的微孔中5-10次抽吸,混合均匀
l 将加入牛奶样品的冻干试剂微孔放置在温度设定为40℃的温育器上
l 40℃温育1分钟(温育时间不要超过1分钟)
l 将测试条插入到试剂微孔中
l 40℃继续温育8分钟
l 从微孔中取出测试条
l 去掉测试条下端的吸水海绵,使用Readsensor仪器进行结果判读
反应机理:
Melaminesensor是一种竞争性检测,含有与三聚氰胺分子高度结合的特定抗体。检测需要两部分,一部分是包含有一定数量的金标抗体的微孔,另一部分是测试条。上面有两条俘获线,其中位于上方的是控制线(CTRL),而位于下方的是检测线(TEST)。在第一次1分钟温育时(40℃),微孔中的试剂和牛奶样品反应,特定的抗体会结合相应的分析物。当插入测试条后,样品液体会沿着试纸条垂直向上渗透并通过测试条上的俘获区域。当样品中没有三聚氰胺时,测试条检测线位置处会出现有颜色的条带,指示牛奶样品中不存在三聚氰胺;相反,如果样品中有三聚氰胺存在时,测试条上的检测线位置处不会出现有颜色的条带。
试剂盒组成:
每个试剂盒所含试剂可供96次检测。
l 每盒12筒,每筒含8个装有冻干试剂的微孔和8个测试条
l 1把200μl的微量移液器和配套吸头
l 1份说明书
检测下限和检测方法的选择:
采用不同的结果判读标准,本试剂盒有不同的检测限。
l 250ppb 的结果判读:根据方法一操作要点进行试验
l 125-250ppb的结果判读:根据方法二操作要点进行试验
注意事项:
1. 试剂盒保存在2℃-8℃。使用之前恢复至室温,避免暴露在潮湿和光照条件下。
2. 最好使用当天新鲜的牛奶。不能使用结块变质的牛奶。
3. 检测的最佳温度为40℃±3℃,可使用“Heatsensor”温育器或水浴锅,不建议使用其他类型温育器(请按照温育器操作说明书正确设定温育时间和温度)。
4. 第二次温育后,立即读取检测结果。如果不能立即读取检测结果,务必立即去掉测试条下端的吸水海绵,并在5分钟内读取结果。
5. 仪器读取结果必须使用配套Readsensor(参见使用说明书)。读取结果前,务必确认Readsensor电源已经打开并完成仪器内置空白程序的校准。
6. 测试条干燥后颜色深度会增加。
7. 如发现阳性,检测结果需要进行确证。
8. 使用试剂时,用完一筒试剂再打开另外一筒,以免受潮失效。
溶解奶粉:
取10g奶粉充分溶解于90ml 40℃蒸馏水中,建议使用涡漩混合器震荡混匀。
操作步骤
可用于大批量检测,也可用于单一测试。在操作过程中,混合试剂和奶样、插入或取出测试条等步骤均要尽量避免时间延误。请确保检测样品温育时间和温度的一致性。一次检测样品数量不要超过8个,如果每次检测超过2个样品,建议使用多通道移液器加样以保证反应时间的一致性。如果一次检测样品数量超过8个,请按照8个一组,分批检测。
1. 洗干净手,从冰箱中取出试剂盒, 在干燥洁净的实验条件进行操作。
2. 调节温育器温度至40℃。一般需要10分钟使温育器达到并稳定在40℃。
3. 当试剂盒温度达室温时,打开试剂筒准备开始实验,同时认真阅读操作说明。
l 试剂筒包含两部分:测试条和装有冻干试剂的微孔。
4. 如果用仪器进行结果判读,要预先打开仪器(ReadSensor)并完成机器内置的空白校准。
5. 确定待测牛奶样品的数量,并做好标记。
l 牛奶样品必须为均匀液态,不能有结块或沉淀,样品温度在4℃-20℃。
6. 根据样品数量,取出相应数量的试剂微孔和测试条。
l 如一次用不完8个微孔,可盖住剩余微孔并放回试剂筒中密封保存。
l 轻轻打开微孔盖子,确定所有的冻干试剂均保留在微孔中。
7. 吸取200μl牛奶样品于微孔中。
8. 缓慢抽吸5-10次充分混匀,混合液颜色为粉色,尽量避免气泡的产生。
注意:当微孔中试剂和牛奶接触后,反应便开始进行,请尽量快速操作,将微孔置于温育器后请立即按下START(R/S)按键开始1分钟计时。
l 在温育过程中,微孔中的三聚氰胺抗体与牛奶样品中可能存在的三聚氰胺进行结合,温育时间为1分钟。
9. 将微孔置于温度设置为40℃的温育器上。
10. 第一次1分钟的温育结束后,按下温育器START(R/S)按键停止计时,将测试条插入微孔中(吸水海绵端朝下),并使之充分浸没到溶液中。再次按下温育器START(R/S)按键,开始第二次温育计时,时间4或8分钟。
11. 第二次温育结束后,按下温育器START(R/S)按键停止计时,取出测试条。
12. 立即目测判读结果。如果用仪器判读,请取掉测试条下端的吸水海绵垫,注意不要接触或损坏测试条中部检测区域并在5分钟内完成判读。
13. 检验完毕,余下的测试条放回到试剂筒中盖紧瓶盖, 2℃-8℃保存。